一、 貼壁細(xì)胞

接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片， 顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。

用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的) 。

嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)，放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

用PBS 2-3mL輕輕洗細(xì)胞表面，洗1-2遍，吸走PBS，加入0.25%胰酶EDTA 1ml,37度培養(yǎng)箱消化，消化到顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓但未完全脫落時(shí)，吸取正在消化的胰酶輕輕吹打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止消化，混勻細(xì)胞。

900rpm, 3min離心，加新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。

傳代換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，放置于37℃，5% CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

二、 懸浮細(xì)胞

接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。

用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。

嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的細(xì)胞吹打均勻,用吸管將培養(yǎng)基完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。

900rpm, 3min離心，加新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。

換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基，放置于37℃，5% CO?的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。