一、不同廠家胎牛血清的批號(hào)篩選

1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)用血清的基本要求

用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的血清，應(yīng)富含細(xì)胞活性物質(zhì)，尤其有豐富細(xì)胞生長因子、維生素、氨基酸等成分，但不能有微生物污染，尤其不能有細(xì)胞型微生物。首-選的培養(yǎng)用血清是胎牛血清，其次可以經(jīng)特定篩選后選擇使用某些品牌的新生牛血清或小牛血清。在配液標(biāo)識(shí)的書寫上，一般用FCS表示胎牛血清，用BS表示牛血清。

由于在血清超濾除菌時(shí)，沒有細(xì)胞壁的原核微生物支原體可能容易通過0.22μm的細(xì)菌濾器，甚至通過0．lμm的細(xì)菌濾器。

考慮到上述因素，使得不同廠家的血清，在細(xì)胞生長因子種類與濃度等方面存在不同，殘留微生物的風(fēng)險(xiǎn)也不同，即便相同廠家的血清也可能存在批間差異。

2．血清篩選方法

普通的血清質(zhì)量篩選方法是利用特定細(xì)胞株的克隆化培養(yǎng)進(jìn)行。選擇克隆形成率高的血清批號(hào)進(jìn)行購買。

可以比較出不同廠家的血清或相同廠家的不同批號(hào)的血清質(zhì)量差異，購買時(shí)盡量選擇細(xì)胞生長快、克隆形成時(shí)間短、無細(xì)胞畸形、無微生物污染特別是支原體污染的批號(hào)。

3．進(jìn)口血清的篩選原則

盡量選擇供貨量大，使用用戶廣泛的、信譽(yù)良好的品牌產(chǎn)品，如Gibco品牌、ATCC品牌。批量購買前，應(yīng)做克隆化細(xì)胞培養(yǎng)，判斷該批號(hào)血清的質(zhì)量水平。

購買時(shí)，最-好直接向一級(jí)代理商訂購。如果經(jīng)手二級(jí)、三級(jí)代理商訂購，很可能由于運(yùn)輸、保存等環(huán)節(jié)的增加而引入不可預(yù)知的風(fēng)險(xiǎn)。如反復(fù)凍融多次的血清，其中的細(xì)胞生長因子等細(xì)胞活性物質(zhì)將明顯縮減，不利于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

4．國產(chǎn)血清的篩選原則

盡量選擇供貨量大，供貨歷史比較長，信譽(yù)良好，使用用戶比較廣泛的那些廠家進(jìn)行血清購買前的篩選。

批量購買前，務(wù)必核實(shí)可購買的批號(hào)和供貨量，并及時(shí)做克隆化細(xì)胞培養(yǎng)，判斷該批號(hào)血清的質(zhì)量水平。

購買時(shí)，盡量購買一個(gè)批號(hào)的血清。最-好直接向一級(jí)代理商訂購，如果經(jīng)手二級(jí)、三級(jí)代理商訂殉，很可能由于運(yùn)輸、保存等環(huán)節(jié)的增加，或經(jīng)手人的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)背景薄弱等因素，從而引入不可預(yù)知的風(fēng)險(xiǎn)，導(dǎo)致不必要的經(jīng)濟(jì)損失，影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和生產(chǎn)進(jìn)度。如果不得不向二級(jí)、三級(jí)經(jīng)銷商購買，務(wù)必詳細(xì)寫明訂單要求，注明必要的注意事項(xiàng)。

二、血清的滅活

關(guān)于未滅活血清與滅活血清的判識(shí)，可以通過仔細(xì)閱讀所購血清的說明書，或直接聯(lián)系信譽(yù)好的供貨商，便可以清楚是否已經(jīng)滅活。

已經(jīng)滅活的血清在使用前無需滅活處理，否則，需要用戶自行按血清滅活方法進(jìn)行滅活處理方可用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

血清滅活的主要理由是使血清中含有的補(bǔ)體滅活，以免用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)發(fā)生補(bǔ)體攻擊細(xì)胞膜，導(dǎo)致所培養(yǎng)的細(xì)胞壞死。滅活條件下，也能滅活血清中可能存在的支原體。

三、滅活血清的無菌分裝與保存

滅活后的血清應(yīng)及時(shí)按預(yù)計(jì)的每次使用量進(jìn)行無菌分裝，減少血清凍融的次數(shù)，以免血清中的細(xì)胞活性物質(zhì)受破壞。分裝后，加寫標(biāo)識(shí)，平衡到室溫后轉(zhuǎn)入-20℃冰箱存放。